تأثير مستخلصات نبات السبحبح على الخلايا السرطانية والخلايا اللمفاوية لدم الإنسان

ناقش قسم علوم الحياة في كلية العلوم بجامعة ديالى رسالة طالبة الماجستير مريم حكمت عبد اللطيف والموسومة (تأثير إستخدام القلويدات المستخلصة من نبات السبحبح Melia azedarach على الخلايا السرطانية والخلايا اللمفاوية لدم الإنسان) وذلك في يوم الإثنين الموافق 2017/1/23 وعلى قاعة المناقشات في عمادة الكلية.

هدفت الدراسة الى اختبار تأثير المستخلصات الكحولية والقلويدات الخام المستخلصة من نبات السبحبح Melia azedarach في خطين خلويين سرطانيين هما سرطان الكبد البشري Liver cancer cells HepG2 وسرطان المريء Oesophagus cancer cells SK-GT2 والخط الطبيعي لكبد الانسان Liver normal cells WRL68 . تم الكشف الكيميائي عن بعض المكونات الكيميائية لمستخلص ثمار نبات السبحبح , فظهر أن النبات يحتوي على مجموعة من المركبات الكيميائية مثل القلويدات ، الفلافونات ، التانينات ، التربينات والسترويدات الخ.

في هذه الدراسة تم تسليط الضوء على تأثير المستخلص الكحولي و القلويدي الخام لثمار نبات السبحبح Melia azedarach على الخطوط السرطانية HepG2 ,GT-SK والخط الطبيعي WRL68 و باختبارات مختلفة . تضمن الاختبار الاول تأثير المستخلصين الكحولي و القلويدي على انقسام الخلايا اللمفاوية لدم الانسان، اذ وجد أنَ المستخلص الكحولي الخام والقلويدي الخام لثمار السبحبح أدىَ الى ايقاف انقسام الخلايا اللمفاوية لدم الانسان في الطور الاستوائي، بنسب مختلفة إذ ازدادت النسبة مع زيادة التركيز, و تراوحت نسبة الخلايا المتوقفة في الطور الاستوائي للمستخلص الكحولي بين (0.30%-2.90% ) للتراكيز من (12.5-400) مكغم/مل ، اما بالنسبة للمستخلص القلويدي كانت نسبة الخلايا المتوقفة في الطور الاستوائي بين (0.56%-3.83%) للتراكيز من (12.5-(400 مكغم/مل. و الاختبارالثاني تضمن تأثير المستخلصين الكحولي و القلويدي على نمو خلايا الخطوط الخلوية السرطانية HepG2 , SK-GT2 و الخط الطبيعي WRL68 باستخدام اختبار 3-(4,5-dimethythiazol- 2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide MTT .

اذ وجد ان لكلا المستخلصين سّمية خلوية على الانواع المختلفة من الخلايا السرطانية تعتمد درجة تأثيرهما على تركيزه و نوعي المستخلص و الخلايا . فمن ناحية تأثير التركيز فقد وجد أنّ الفعالية المضادة للاورام تزداد مع ازدياد تركيز المستخلص . ومـن ناحية اخرى نـوع خـلايا الخـط السـرطاني فقـد وجـد ان نسـب تثبيـط نموها بتأثير كل مـن المستخـلصين تختـلف باختلافهما، حيث كانت اقل نسبة تثبيط للمستخلص الكحولي هي 9.8% بتركيز 12.5مكغم/مل واعلى نسبة هي %59.2 بتركيز400 مكغم/مل لخـلايا الخط السرطاني HepG2، اما خلايا الخط السرطاني SK-GT2 فكانت اقل نسبة تثبيط للمستخلص الكحولي هي 4.3% بتركيز 12.5مكغم/مل واعلى نسبة هي %36.3 وبتركيز 400 مكغم/مل ، بالنسبة للخط الطبيعي WRL68 اقل نسبة تثبيط 3.07% بتركيز 12.5مكغم/مل ، اعلى نسبة تثبيط 28.11% بتركيز 400 مكغم/مل , اما للمستخلص القلويدي كانت اقل نسبة تثبيط هي 30.4% بتركيز 12.5 مكغم/مل ، اعلى نسبة هي 65% وبتركيز 400 مكغم/مل لخـلايا الخط السرطاني HepG2، اما خلايا الخط السرطاني SK-GT2 فكانت اقل نسبة تثبيط للمستخلص القلويدي هي 3.7% بتركيز 12.5 مكغم/مل ، اعلى نسبة هي 30.8% وبتركيز400. مكغم/مل , وللخط الطبيعي WRL68 اقل نسبة تثبيط 0.86% بتركيز 12.5مكغم/مل و اعلى نسبة تثبيط 14.8% بتركيز 400 مكغم/مل. ومن خلال نتائج الاختبار السابق تم اختيار المستخلص القلويدي للدراسة في اختبار اخر على خلايا الخط السرطانيHepG2 .

فقد تم استخدام اختبار High Content Screening (HCS) لدراسة سّمية المستخلص القلويدي على خلايا الخط السرطاني HepG2 من خلال قياس التغيرات التي تحدث في بعض المؤشرات الخلوية والتي تشتمل على: نفاذية الخلية Cell permeability وعدد الخلايا Cell count والمحتوى النووي للخلايا Nuclear intensity ، نفاذية غشاء المايتوكوندريا Mitochondrial membrane potential MMP ، مستوى تحرر سايتوكروم سي Cytochrome C من الخلايا، ومن نتائج هذا الاختبار فقد لوحظ ان للمستخلص القلويدي تأثيراً واضحاً على نفاذية الخلايا السرطانية بسبب الاضرار التي تحدث في الغشاء الخلوي للخلايا والمؤدية الى زيادة نفاذية الاغشية الخلوية ، و على المسارات الايضية للمايتوكوندريا داخل الخلية من خلال مراقبة التغيرات التي تحدث في نفاذية اغشية الماتوكوندريا وقياس مستوى تحرر السايتوكرومC ، و كذلك على الكثافة النووية للخلايا السرطانية عند التركيز العالي400 مكغم/مل ، بينما لوحظ التأثير اقل على الخلايا عند التراكيز الأخرى 200,100 مكغم/مل.

وقد تألفت لجنة المناقشة من السادة المدرجة أسماؤهم في أدناه:

أ. د. غسان محمد سلمان / الجامعة التكنولوجية / قسم التقانة الأحيائية … رئيساً
أ. م. د. محمد عبد الدايم صالح / جامعة ديالى / كلية العلوم … عضواً
أ. م. د. علي زيد فاضل / جامعة النهرين / كلية التقنيات الأحيائية … عضواً
أ. م. د. أبراهيم هادي محمد / جامعة ديالى / كلية العلوم … عضواً ومشرفاً
أ. م. د. عامر توفيق طالب / الجامعة المستنصرية / مركز بحوث السرطان … عضواً ومشرفاً

وتم قبول الرسالة وحصلت الطالبة على درجة الماجستير في تخصص علوم الحياة.