مناقشة رسالة طالبة الماجستير دينا نزار عايش من قسم علوم الحياة

ناقش قسم علوم الحياة في كلية العلوم بجامعة ديالى رسالة طالبة الماجستير دينا نزار عايش الموسومة تشخيص وتوصيف امراضية لبكتريا Proteus mirabilis المعزولة من حالات خمج المسالك البولية وتحديد جينات بعض عوامل الضراوة بتقنية PCR المتعدد وذلك على قاعة المناقشات في عمادة الكلية.

هدفت هذه الدراسه الى عزل وتشخيص بكتريا المتقلبه الرائعه من مرضى التهابات المسالك البوليه.دراسه مدى حساسيه المضادات الحيويه التقليديه لثمانيه عشر مضاد حيوي تجاه protues mirabilis,الكشف عن النمط الظاهري لعوامل ضراوه معينه باستخدام طرق الاستزراع .الكشف الجيني عن بعض عوامل الضراوه لبكتريا المتقلبه الرائعه باستخدام تقنيه تفاعل البلمره المتسلسل (المفرد والمتعدد)وتسلسل الجينات والشجره النشوء والتطور في محافضه ديالى.يشمل جمع العينات مستشفى الخالص العام ومستشفى بعقوبه التعليمي,ومستشفى البتول التعليمي للولاده والاطفال,خلال الفتره الممتده من 5 اغسطس الى 25 يناير 2021 .

تم جمع 300 عينه بول من المرضىالذين يعانون من تضخم المسالك البوليه ويشكون سريريا من العلامات والاعراض ,وتتراوح عمر المرضى 2 الى 56 عاما,وقد تم عزل وتحديد المتقلبه الرائعه بطرق النمط الظاهري بما في ذلك (المورفولوجيه,والكمياء الحياتيه ,ونظام الفايتك2) والطرق الجزئيه بتقنيه تفاعل البلمره المتسلسل (المفرد والمتعدد)والتسلسل الجيني وشجره التشوء والتطور.تم اجراء حساسيه الميكروبيه للمضادات الحياتيه بطريقه نشر القرص وكانت نسبه حساسيه العزلات للمضادات (للامبسلين والببراسيلين والاوكمنتين 4%,28%,32%) على التوالى. بينما كانت نسبة الحساسية لمجموعة السيفالوسبورينات (سيفبيمي ، سيفالوتوكسيم ، سيفوكسيتين وسيفلازيديم 8.0٪ ، 24.0٪ ، 24.0٪ و 16.0٪ على التوالي ، فيما يخص النسبة المئوية لعزلات P. mirabilis الحساسة للإيميبينيم والميروبينيم والجنتاميسين والأزيثروميسين. و Tetracycline 40.0٪ ، 56.0٪ ، 24.0٪ ، 24.0٪ و 28.0٪ على التوالي ، بالمقابل كانت نسبة العزلات الحساسة للسيبروفلوكساسين ، الليفوفلوكساسين ، حمض الناليديكسيك ، Trimethoprim-Sulfamethoxazole ، Chloramphenicol و Nitrofurantion و8.0٪ على التوالي. علاوة على ذلك ، تم تحديد MIC لـ Cifipime و Meropenem بواسطة لوحة microtiter. بالإضافة إلى ذلك ، تم تقييم تكوين الأغشية الحيوية لهذه العزلات بطريقة لوحة microtiter. وفقًا لطرق الكشف عن النمط الظاهري ، تم تحديد 25 من 300 على أنها p.mirabilis. تم العثور على أعلى معدل عزل بين المرضى الذين تتراوح أعمارهم بين 20-29 سنة (36.0٪). أنثى (64.0٪) ، سكن ريفي (60.0٪) ، بول حمضي (76.0٪) ، عينات بول تحتوي على 10 خلايا صديد / HPF ، وعينات بول تحتوي على 10 كرات دم / HPF. فيما يتعلق بعوامل الفوعة ؛ جميع العزلات (100٪) كانت موجبة للهيموليزين ، اليورياز ، البروتياز ، حامض الحديد ، المستعمرة 1 ، 2 ، و 3. بالإضافة إلى ذلك ، 11 (44.0٪) قوية و 11 (44.0٪) معتدلة بيوفيلم سابقًا ، في حين أن 3 فقط (12.0٪) كانت غير بيوفيلم. كان تكوين البيوفيلم لعزلات P. mirabilis مرتبطًا بشكل غير معنوي بجنس وإقامة المرضى أو وجود خلية صديدية أو وجود كرات الدم الحمراء. فيما يتعلق بحساسية المضادات الحيوية ، وجدت النتائج أن غالبية عزلات P. ميرابيليس مقاومة لمعظم المضادات الحيوية ومضادات الجراثيم الـ 18 المستخدمة في الدراسة الحالية.80.0٪ ، 64.0٪. 12.0٪ ، 4.0٪ ، 24.0٪ ووجدت نتيجة الطرق الجزيئية Singleplex PCR أن جميع العزلات (100٪) تحتوي على جين Zap ، وجين Urec ، وجين Mrp ، وجين FlaA. بينما كانت العزلات (40٪) تحتوي على جين Esp. أظهرت نتيجة تقنية تعدد الإرسال PCR لجينات (ZapA، FlaA) أن 100٪. أظهرت نتائج التسلسل اكتشاف ثلاثة بدائل للحمض النووي لفطر P. mirabilis. G159A و G349A و G439T موزعة بشكل متفاوت على 25 عزلة. لوحظ المتغير G439T في شجرة النشوء والتطور نحو سلالة المتقلبة الرائعة الصينية ZA25 ، بينما لوحظ G159A تجاه السويد المتقلبة الرائعة ، سلالة CCUG 70746. في المقابل ، لم تحدث متغيرات G349A أي انحراف في تحديد المواقع التطورية لعزلات P. mirabilis التي تم فحصها حاليًا. وخلصت الدراسة الحالية إلى أن P. ميرابيليس قد تم استعادته بشكل ملحوظ من عينات بول المرضى الذين يعانون من عدوى المسالك البولية والتي تكون في الغالب مقاومة لمعظم المضادات الحيوية المتاحة وأن أمبليكونات ZapA أظهرت تمييزًا شديد الحساسية بين العزلات التي تم فحصها ، مما يشير إلى فصل نسبي قوي ، مما يشير إلى فرص عمل محتملة. لأمبليكون ZapA كعلامة محتملة من حيث الفصل بين المتقلبة الرائعة المستردة من عدوى المسالك البولية.