مناقشة رسالة طالبة الماجستير آسيا قحطان أحمد من قسم علوم الحياة

ناقش قسم علوم الحياة في كلية العلوم بجامعة ديالى رسالة طالبة الماجستير آسيا قحطان أحمد الموسومة التشخيص الجزئي للجينات المشفره لبعض عوامل الفوعه في الاشريشيا القولونية الممرضة المعزولة من حالات السريرية لنساء مصابات في محافظة ديالى وذلك على قاعة المناقشات في عمادة الكلية.

أوضحت الطالبة في دراستها أن بكتريا الايشريشيا القولونية احد اهم مسببات االتهابات المجاري البولية في النساء والتي تمتلك قابلية على مقاومة المضادات الحيوية المختلفة ويرجع ذلك لامتلاكها العديد من عوامل الضراوة التي تمكنها من احداث الإصابة الشديدة والمزمنة في النساء. تم عزل 30 عزلة من بكتريا الايشريشيا القولونية من مجموع 200 عينة ادرار وبنسبة (15%) من نساء تعاني من التهابات المجاري البولية في مستشفى السعدية العام , ومستشفى جلولاء العام, ومستشفى خانقين العام, شملت نساء حوامل وغير حوامل ولاعمار تتراوح من (15-40) سنة ومن مناطق شرق محافظة ديالى خلال الفترة من 1/9/2020 ولغاية 1/11/2020. تم التشخيص الاولي لعزلات E. coli باستخدام الأوساط الزرعية الملائمة (وسط الماكونكي اكار, وسط والايوسين المثيلين الأزرق, وسط اكار الدم) واستخدم وسط السوربيتول ماكونكي اكار لتشخيص EHEC من العزلات. استخدمت الاختبارات البيوكيميائية وجهاز Vitek 2 System لتاكيد التشخيص النهائي للعزلات. كان العدد الأكبر للعزلات البكتريا من النساء الحوامل (11) عزلة من (24) نمو موجب وبنسبة (45.8%) و(19) عزلة من (101)نمو موجب وبنسبة (18.8%) وقد تم العثور على 3 عزلات EHEC و بنسبة 10%.

تم اجراء فحص الحساسية للعزلات باستخدام مضادات حيوية مختلفة وكانت نتائج المقاومة كما يلي: nalidixic acid (86%), cefepime (76%), azetreonam (73%), cefotaxime (70%), ceftrazidime (70%), ciprofloxacin (66%), ceftriaxone (63%), cefoxitin (63%), amoxicillin-clavulate (60%), tetracycline (46%), chloramphenicol (46%), piracillin (46%), pipracillin-tazobactam (40%), impenem (30%), meropenem (20%).

اختلفت العزلات في مقاومتها للمضادات الحيوية واظهرت نمطين من المقاومة: MDR والتي تشمل العزلات التي قاومت ثلاث مجاميع من المضادات الحيوية ونمط XDR التي قاومت اربع او خمس مجاميع من المضادات الحيوية المختلفة. تم قياس MIC لجمع العزلات البكتيرية لمضادين هما ceftazidime و cefepime باستعمال وسط مولر هنتون اكار والتخافيف المتسلسلة من المضادات وكانت نتيجة MIC 256 و 1024عالتوالي .

شملت الدراسة أيضا الكشف المضهري لعوامل الضراوة التي تملكها بكتريا ال E.coli لمعرفة شدة امراضيتها ,حيث كشف عن قابلية انتاج الغشاء الحيوي بطريقتين الأولى طريقة الانبوب (MT) والطريقة الثانية الصفيحة المعيارية (MTP) واضهرت النتائج ان 19 عزلة (63.3%) مكونة للغشاء بالطريقة الأولى و25 عزلة (83.3%) مكونة للغشاء بالطريقة الثانية . كما كشف مضهريا عن قابلية العزلات على انتاج انزيمات البيتا لاكتام الواسعة الطيف ESBLs باستخدام طريقة Double-Disk Synergy Test وكانت النتائج 19 عزلة منتجة للانزيم و(11) غير منتجة . اما قابلية العزلات على انتاج الهيمولايسين فقد كشف عنها مضهريا باستخدام وسط Sheep blood agar وكانت النتيجة كما يلي: (3) عزلات منتجة تحلل من نوع بيتا و(9) عزلات تحلل من نوع الفا (18) عزلة تحللها كاما. اما احتواء العزلات على الكبسولة فقد كشف عنها مضهريا في هذه الدراسة باستخدام صبغة النكروسين والفحص المجهري المباشر واضهرت النتائج ان 23 عزلة (76.6%) منتجة للكبسولة . كما كشف مضهريا عن قابلية العزلات البكتيرية على الحركة واحتوائها على الاسواط باستخدام وسط Semi-solid media وكانت النتيجة ان جميع العزلات وبنسبة 100% حاوية على اسواط.

ضمنت الدراسة الحالية الكشف الجزيىي لجينات الضراوة في 15 عزلة بكتيرية من مجموع 30 .استخدمت تقنية Multiplex PCR في الكشف عن جينات الالتصاق (fimH, pap, sfa) وعن جين (ompT) الذي له دور مهم في انتاج الغشاء الحيوي واضهرت النتائج ان 15 عزلة وبنسبة 100% حاوية على جين fim و12 عزلة وبنسبة 80% حاوية على جين pap و10 عزلات وبنسبة 66% حاوية على جين ompT اما جين sfa فقد ظهر في 7 عزلات وبنسبة 46%. كما كشف عن جين kpsMII المسؤول عن انتاج الكبسولة باستخدام تقنية Uniplex PCR وكانت نسبة وجود هذا الجين في 8 عزلات 53% ,استخدمت نفس التقنية في الكشف عن جين bla-TEM المسؤول عن تشفير انزيمات ESBLs وعن جين eae المستخدم في الكشف عن EHEC والمسؤول عن تشفير بروتين الانتيمبن واضهرت النتائج ان 9 عزلات وبنسبة 60% حاوية على جين ال bla-TEM و 4 عزلات وينسبة 26.6% حاوية على جينeae , 3 منها عائدة الى EHEC.