مناقشة رسالة طالب الماجستير مناف ثامر صالح من قسم علوم الحياة

ناقش قسم علوم الحياة في كلية العلوم بجامعة ديالى رسالة طالب الماجستير مناف ثامر صالح الموسومة النشاط المضاد للميكروبات والمضاد للبيوفيلم لبعض المعززات الحيوية الجديدة ممزوجة بالمضادات الحيوية ضد العزلات السريرية لبكتيريا Acinetobacter spp. المرضية وذلك في يوم الثلاثاء الموافق 2021/5/25 وعلى قاعة المناقشات في عمادة الكلية.

أوضح الطالب في مقدمة رسالته: ظهرت بكتيريا الراكدة البومانية كمسبب مرضي خطير في المستشفيات بسبب مقاومتها للمضادات الحيوية وقدرتها على الاستعمار والتسبب في التهابات شديدة للمرضى. هدفت هذه الدراسة إلى التحقيق في الخاصية المضادة للبكتيريا والمضادة للبيوفيلم للمستخلص الخالي من خلايا سلالات بكتيريا المعززات الحيوية ضد الراكدة البومانية وإثبات التأثير التآزري للكوليستين مع المستخلص الخالي من خلايا المعززات الحيوية، المنتخبة في هذه الدراسة، ضد العزلات السريرية للراكدة البومانية المتعددة المقاومة للأدوية.

خلال الدراسة الحالية ، تم تشخيص 20 (8.69٪) عزلة سريرية للراكدة البومانية من إجمالي 230 عينة تم جمعها من مصادر مختلفة شملت الحروق والجروح والدم. أخذت هذه العينات من المرضى المراجعين و المقيمين في مستشفى بعقوبة التعليمي/ديالى خلال شهر أيلول2020 حتى نهاية كانون الاول2020. تم تشخيص العزلات البكتيرية بناءً على الخصائص المظهرية والاختبارات الكيميوحيوية الأولية. تم تأكيد التشخيص و فحص الحساسية للمضادات الحيوية للراكدة البومانية باستخدام جهاز VITEK 2.

تم استخدام الاطباق الدقيقه ذات96حفره للتجارب التالية ؛ تكوين غشاء حيوي بواسطة الراكدة البومانية و اختبار التجمع المشترك، اضافة الى، تحديد التركيز المثبط الأدنى (MIC) و التركيز الأدنى المثبط للبيوفيلم البكتيري (MIC-B) للمضادات الميكروبات المستخدمة في هذه الدراسة، وحدها أو مجتمعة. تم خلط الكوليستين مع المستخلص الخالي من بكتيريا المعززات الحيوية المختبرة لتحديد طبيعة التفاعلات الدوائية للمضادة المستخدمة؛ التآزر أو التضاد أو التأثير الإضافي باستخدام اختبار انتشار القرص وطريقة رقعة الشطرنج.

أظهرت النتائج أن أعلى معدل عزل للبكتيريا المرضية كان من الحروق 9 (45٪) وعدوى الجروح 6 (30٪) بينما تم عزل نسبة منخفضة من عينات الدم 5 (25٪). جميع العزلات البكتيرية (100٪) من الراكدة البومانية كانت لديها القدرة على تكوين بيوفيلم "قوي" اضافة الى انها كانت (100٪) مقاومة للمضادات الحيوية التالية؛ أمبيسلين، بيبراسيلين/تازوباكتام، سيفازولين، سيفوكسيتين، سيفتازيديم، سيفترياكسون، ميروبينيم، سيبروفلوكساسين، ليفوفلوكساسين و سيفيبيم. بالاضافة الى انه كانت (95٪) من العزلات السريرية مقاومة للإيميبينيم والأميكاسين، و (90٪) منها كانت مقاومة لـ الجنتامايسين و توبرامايسين ، بينما (75٪) منها كانت مقاومة لـترايميثوبريم – سلفاميثاكزازول. لقد لاحظنا أن جميع عزلات الراكدة البومانية (100%) كانت حساسة للكوليستين و (85٪) منها كانت حساسة تايجيسايكلين و مونوسايكلين. تم تحديد غالبية 13 (65 ٪) من عزلات الراكدة البومانية على أنها مقاومة للأدوية على نطاق واسع (XDR) و 7 (35%) منها كانت مقاومة للأدوية المتعددة (MDR).

لم يظهر المستخلص الخالي من خلايا المعززات الحيوية التالية:Bacillus subtilis KATMIR1933 و Bacillus amyloliquefaciense B-1895 أي نشاط (حتى عند استخدام 100٪) ضد عوالق بكتيريا الراكدة البومانية، ولكن كان تأثيره طفيفًا على تكوين الأغشية الحيوية للراكدة البومانية. في حين تم تسجيل نشاط مضاد للميكروبات قوي وكذلك تاثير مضاد للبيوفلم المكون من قِبل الراكدة البومانية عندما تم استخدام 50 ٪ (MIC و MIC-B) من المستخلص الخالي من خلايا عصيات اللبنية Lactobacillus casei CNCMi 1572 و العصيات اللبنية المخلوطة mixed lactobacilli مما تسبب في تثبيط (100 ٪) من الأغشية الحيوية المكونة بواسطة الراكدة البومانية.

أظهرت الدراسة أن النسبة المئوية للتجمع المشترك بين سلالات المعززات الحيوية و الراكدة البومانية كانت أعلى مقارنة بالتجميع الذاتي الفردي. كان التجميع الذاتي لعصيات Bacillus amyloliquefaciense B-1895 أعلى مما لوحظ في Bacillus subtilis KATMIR1933 و L. casei CNCMi 1572 وكذلك الـ mix lactobacilli.

بناءًا على تطبيق الـ isobologram وإجمالي التركيز المثبط الجزئي (FIC∑)، فان المستخلص الخالي من خلايا سلالات المعززات الحيوية كان متآزرا مع الكولستين ضد كلا من عوالق الخلايا والاغشيه الحيوية لثلاث عزلات من الراكدة البومانية المختارة في هذه الدراسة و المعزولة من الجروح والحروق و الدم. كان MIC و MIC-B للكوليستين بالاشتراك مع المستخلص الخالي من خلايا سلالات المعززات الحيوية (Bacillus subtilis KATMIR1933 و Bacillus amyloliquefaciense B-1895 و Lactobacillus casei CNCMi 1572 و mix lactobacilli) أقل مقارنة باستخدامه بمفرده ضد عزلات الراكدة البومانية.

من خلال هذه الدراسة توصلنا إلى أن المضاد الحيوي كوليستين تزداد فعاليته عندما يمزج بالمستخلص الخالي من الخلايا لسلالات المعززات الحيوية، وبالتالي سيتم استخدام تركيز أقل من هذا المضاد الحيوي، مما يقلل بدوره من الآثار الجانبية التي يسببها الكولستين.

وتألفت لجنة المناقشة من السادة المدرجة أسماؤهم أدناه: