مناقشة رسالة طالبة الماجستير نياف ماجد علي من قسم علوم الحياة

ناقش قسم علوم الحياة في كلية العلوم بجامعة ديالى رسالة طالبة الماجستير نياف ماجد علي الموسومة تأثير مضادات الحياة على تكوين الغشاء الحيوي في عزلات بكتريا الزائفة الزنجارية Pseudomonas aeruginosa وذلك في يوم الاثنين الموافق 2021/5/24 وعلى قاعة المناقشات في عمادة الكلية.

تضمنت الدراسة جمع مائتي عينة من مصادر مختلفة (بول ، جروح ، اذن ، حروق ، قشع) من المستشفيات الحكومية في بعقوبة / ديالى، خلال فترة الدراسة من ايلول / 2020 الى كانون الثاني / 2021. تم زرع العينات على اوساط انتقائية وتفاضلية ، تم التعرف على 26 عزلة من بكتيريا P. aeruginosa من خلال خصائص المستعمرات والفحص المجهري والاختبارات البيوكيميائية. أكد التعرف على 26 عزلة من P.aeruginosa نظام VITEK-2 المضغوط.

هذه العزلات أعطت نتيجة إيجابية لاختبارات الأوكسيديز والكاتاليز واختبار استهلاك السترات، وأظهرت قدرتها على النمو على وسط MacConkey agar و وسط agar Pseudomonas و وسط Blood agar وتسببت في انحلال الدم ((β، النمو عند 42 درجة مئوية، والقدرة على إنتاج الصباغ. بينما أعطت نتائج سلبية لاختبار الاندول واختبار الميثيل الأحمر واختبار فوجيس-بروسكاور وتخمير اللاكتوز والنمو عند 4 درجات مئوية.

نتائج الكشف المظهري لبعض عوامل الضراوة أظهرت ان جميع العزلات انتجت الهيموليسين ، الحركة ، الليبز ، البروتيز ، الجيلاتينز واليوريز بنسب 100٪ ، 100٪ ، 96.15٪ ، 65.38٪ ، 57.69٪ و 11.53٪ على التوالي.

تكوين الاغشية الحيوية كشفت بالطريقة الكمية باستخدام صفيحة ميكروتيتر بإنتاجية مختلفة بين قوية ومتوسطة وغير ملتصقة ، وأظهرت النتائج أن 24/26 (92.30٪) من العزلات أنتجت الاغشية الحيوية من بينها 38.4٪ من العزلات كانت منتجة للاغشية الحيوية بصورة قوية و 53.8٪ منتجة للاغشية الحيوية بصورة متوسطة، بينما اثنتان فقط من العزلات 7.6٪ غير منتجة للاغشية الحيوية.

تم إجراء اختبارات الحساسية للمضادات الحيوية لـ 26 عزلة مقابل 13 نوعًا مختلفًا من المضادات الحيوية باستخدام طريقة Kirby Bauer Disc Diffusion. أظهرت النتائج أن أقل نسبة مقاومة للمضادات الحيوية كانت ضد Piperacillin / Tazobactam ( 3.8٪) ونسبة مقاومة أعلى ضد Ticarcillin / Clavulanic acid ( ٪( 69.2 بينما بلغت نسبة المقاومة لكل من Aztreonam و Cefepime و Meropenem و Netilmicin (38.4٪). Ceftazidime ، Ciprofloxacin ، Levofloxacin وTobramycin (34.6٪). بينما كانت نسبة مقاومة المضادات الحيوية Gentamicin و Imipenem (26.9٪) ، Amikacin (30.7٪). المقاومة للأدوية المتعددة (MDR) شكلت (42.3٪) من مجموع العزلات في الدراسة الحالية.

تم استخدام طريقة التخفيف التسلسلي لتحديد الحد الأدنى للتركيز المثبط (MIC) والتركيز المثبط الأدنى الفرعي (Sub_ MIC) والحد الأدنى لتركيز مبيد الجراثيم (MBC) ضد اثنين من المضادات الحيوية هما Imipenem و Ceftazidime لعشر عزلات مختارة وفقًا لتكوين الاغشية الحيوية بصورة قوية. أظهرت النتائج وجود اختلافات في قيم MIC و MBC. تراوحت MIC لـ Ceftazidime من (16-1024 ميكروغرام / مل) ، وتراوحت MBC من (128 -> 1024 ميكروغرام / مل). بينما تراوحت MIC لـ Imipenem (16–512 ميكروغرام / مل) وكان MBC (512-> 1024 ميكروغرام / مل). تم تحديد قيم MIC sub_عن طريق اختيار أقل تركيز مثبط يمكن أن تنمو فيه البكتيريا.

في الدراسة الحالية ، تم اختبار كل مضاد حيوي في MICs sub_ لدراسة التغير في قدرة عزلات P. aeruginosa في تكوين الأغشية الحيوية. أثر كل من sub _MIC لـ CAZ و IMI على الأغشية الحيوية عن طريق تقليل كثافة تكوين الأغشية الحيوية في معظم العزلات بعد الحضانة لمدة 24 ساعة. هذه التأثيرات دلت إلى أن MICs sub_ لـ CAZ و IMI قد تؤثر على عدة مراحل تكوين الأغشية الحيوية. التحقيق في تاثير المضادات الحيوية دون MIC على الأغشية الحيوية البكتيرية المستهدفة إلى تطوير طرق العلاج بالمضادات الحيوية في المستقبل.

تم إجراء اختبار PCR للكشف عن جينات pslA و pslD و pelA التي شاركت في تكوين الأغشية الحيوية بين العزلات السريرية. أوضحت النتائج الحالية وجود pslA و pslD و pelA في جميع العزلات المدروسة. أظهرت النتائج أن 25/26 (96.15٪) من العزلات تحتوي على جينات pslA و pslD بينما 23/26 عزلة (88.46٪) تحتوي على جين pelA. حملت جميع عزلات P. aeruginosa جينات pslA و pslD و pelA بغض النظر عن كثافة الغشاء الحيوي.

وتألفت لجنة المناقشة من السادة المدرجة أسماؤهم أدناه:

أ. د. هادي رحمن رشيد / جامعة ديالى / كلية العلوم .. رئيساً
أ. م. د. علياء معن عبد الحميد / جامعة ديالى / كلية العلوم .. عضواً
أ. م. د. ريا عزت معروف / الجامعة التقنية الوسطى / كلية التقنيات الطبية والصحية .. عضواً
أ. م. د. كريم ابراهيم مبارك / جامعة ديالى / كلية العلوم .. عضواً ومشرفاً

وقد تم قبول الرسالة ومنحت الطالبة درجة الماجستير في علوم الحياة .. ألف مبارك ..