مناقشة رسالة طالبة الماجستير زينة رشيد حميد من قسم علوم الحياة

ناقش قسم علوم الحياة في كلية العلوم بجامعة ديالى رسالة طالة الماجستير زينة رشيد حميد والموسومة الكشف عن إنزيماتNDM-1 في بكتريا Klebsiella pneumoniae المقاومة للكاربنيم وذلك في يوم الأربعاء الموافق 2019/3/6 وعلى قاعة المناقشات الثانية في بناية رقم 4 .

تضمنت الدراسة جمع 250 عينة سريرية من مرضى يعانون من التهابات مختلفة، توزعت ما بين (165) عينة إدرار, و(37) عينة قشع, و29 عينة من مسحات الحروق و19))عينة من مسحات الجروح ومن خلال نتائج الفحوصات الزرعية والفحص المجهري والاختبارات الكيموحيوية، فضلا عن استخدام جهازVITEK2  والتي أظهرت ان ((85 عزلة تعود لبكتريا Klebsiella spp. تضمنت (78) عزلة تعود للنوع Klebsiella pneumoniae, و(5) عزلات تعود للنوع Klebsiella oxytoca وعزلتين تعود للنوع Klebsiella planticola, شخصت ((14 عزلة من بكتيريا K. pneumoniae المقاومة لمضادات الكاربابينيم, أيضا بواسطة تقنية تفاعل البلمرة المتسلسل (PCR) Polymerase Chain Reaction للتحري عن جين 16-23S rRNA, إذ أظهرت النتائج امتلاك 14)) عزلة لهذا الجين وبنسبة (100%(.

اختبرت حساسية عزلات بكتريا K. pneumoniae لـ 12 مضاداً حيوياً, فكانت النسب المئوية لمقاومة المضادات الحيوية: (100%) Ceftazidime, (61%) Ceftriaxone, (82.65%) Cefoxitin, Imipenem (14.1%), (41.02%) Gentamycin, Doripenem (17.7%), Meropenem (17.7%), Tobramycin, (39.74%),Ciprofloxacin  (21.79% , Tetracycline 55.12%)), Pipracillin  (98.71%)و Tigecyclin (39.74%)..

تم التحري عن قدرة بكتيريا K. pneumoniae على إنتاج إنزيمات الكاربابينميز للعزلات قيد الدراسة إذ استخدمت طريقتين للتوصيف المظهري لإنزيمات الكاربابينميز. الطريقة الأولى: هي Combine EDTA Disk Test (CEDT) أشارت النتائج إلى إن تسع عزلات وبنسبة 64.28)%( أعطت نتيجة موجبة للفحص وكانت العزلات المنتجة لهذه الإنزيمات تحمل مقاومة عالية للمضادات الحياتية منها مضاد (Ceftazidime, Pipracillin, Amikacin,  Ceftriaxone, Ticarcillin, Imipenem, Meropenem). في حين أعطت (5) عزلات وبنسبة 35.71)%) نتيجة سالبة للفحص. والطريقة الثانية: هي فحص هودج المحور Modified Hodge Test (MHT) حيث بلغ عدد العزلات المنتجة لانزيمات الكاربابينميز حسب هذا الفحص ((10 عزلات وبنسبة 71.42)%). بينما اعطت 4 عزلات وبنسبة 28.57% نتيجة سالبة للفحص.

وتم تحديد التركيز المثبط الأدنى (MIC) Minimum Inhibition Concentration للعزلات قيد الدراسة باستخدام جهاز VITEK 2. تراوحت قيم MIC للمضادات  Amikacin  و Minocycline بين (µg/ml 2 –64). أما مضادات Gentamycin, Ciprofloxacin 0.25-4) µg/ml) و(1-16 µg/ml) على التوالي. في حين تراوحت قيم MIC للمضادين Imipenem و Meropenem بين (µg/ml 8-16). و Tazobactam  Piperacillin / و Piperacillin لهما قيمة MIC متساوية µg/ml (128=<), أما المضادان Ticarcillin و Ticarcillin/Clavulanic acid كانت قيمهMIC  لهما 128 µg/ml)=<(, والمضاد Tobramycin كانت قيمMIC  له 1-16 µg/ml)) . وأخيرا أظهرت العزلات قيد الدراسة مقاومة عالية للمضاد Trimethoprim/Sulfamethoxazole إذ تراوحت قيم التراكيز المثبطة الدنيا بين20-320 µg/ml)).

استخدمت تقنية (PCR) للتحري عن امتلاك العزلات قيد الدراسة للجينات التي تشفر إلى إنتاج أنزيمات Carbapenemases إذ استخدمت بادئات لاستهداف جينات bla_NDM-1,    bla_OXA-48 و bla_KPC-2. أظهرت النتائج امتلاك (13) عزلة لجين bla_NDM-1, و(9) عزلات لجين    bla _OXA-48 في حين أعطت العزلات جميعاً نتيجة سالبة لجين ₂.bla_KPC- . ودرس التأثير التثبيطي لمادتي ثنائي اوكسيد التيتانيوم ((Tio₂ و اوكسيد الزنك Zno)) ذات الأحجام النانوية تجاه نمو البكتيريا وقدرتها على إنتاج أنزيمات البيتالاكتميز المعدنية لتسع عزلات ذات مقاومة عالية تجاه مضادات الكاربابينيم. بينت النتائج أن التركيز المثبط الأدنى  لمادة اوكسيد الزنك Zno ذات الحجم ((50nm تراوحت بين (µg/ml 1300-325) في حين تراوحت قيمة MIC لمادة ثنائي اوكسيد التيتانيوم Tio₂ ذات الحجم 25nm)) بين (2600-650µm).

أما نتائج تأثير الدقائق النانوية لمادتي اوكسيد الزنك وثنائي اوكسيد التيتانيوم على إنتاج إنزيمات البيتالاكتميز المعدنية فكانت متساوية للمادتين إذ فقدت (5) عزلات من أصل (9) عزلات قدرتها على إنتاج إنزيمات البيتالاكتميز المعدنية وبنسبة (55.55%( .

وتألفت لجنة المناقشة من السادة المدرجة أسماؤهم أدناه:

أ. د. محمد فرج شذر / الجامعة المستنصرية / كلية العلوم … رئيساً

أ. م. د. لمى طه أحمد / جامعة ديالى / كلية الطب … عضواً

أ. م. د. عباس ياسين حسين / جامعة ديالى / كلية العلوم … عضواً

أ. د. هادي رحمن رشيد / جامعة ديالى / كلية العلوم … عضواً ومشرفاً

وقد تم قبول الرسالة ومنحت الطالة درجة الماجستير في تخصص الأحياء المجهرية … ألف مبارك.

<<  الموضوع التالي  |  الموضوع السابق  >>