مناقشة رسالة طالبة الماجستير عبير حبيب أحمد من قسم علوم الحياة

ناقش قسم علوم الحياة في كلية العلوم بجامعة ديالى رسالة طالبة الماجستير عبير حبيب أحمد والموسومة التأثير السمي للمستخلصات القلويدية للسرخس Equisetum arvense في بعض الخطوط السرطانية وذلك في يوم الاثنين الموافق 2019/2/25 وعلى قاعة المناقشات في عمادة الكلية.

أهدفت الدراسة الى اختبار تأثير المستخلص القلويدي الخام لسرخس ذنب الخيل Equisetum arvense على تكاثر الخلايا اللمفاوية لدم الانسان وعلى ثلاثة خطوط سرطانية (خطين خلويين لسرطان الثدي Breast cancer cell lines هماMCF7  و AMJ13وخط سرطان الكبد Liver cancer cell line (HC)٬ فضلاً عن الخط الطبيعي لجنين الفأر (MEF) Mice Embryo Fibroblast Cell line. حيث تم الكشف الكيميائي عن بعض المكونات الكيميائية لمستخلص سرخس ذنب الخيل٬ فظهر ان السرخس يحتوي على مجموعة من المركبات الفعالة مثل القلويدات٬ الفلافونات٬ التانينات٬ التربينات والستيرولات.

وتضمن البحث درست الفعالية المضادة للأكسدة باستخدام اختبار (DPPH) 2,2 diphenyl-picryl hydrazyl للمستخلص القلويدي الخام لسرخس ذنب الخيل٬ وقد أظهرت النتائج امتلاك سرخس ذنب الخيل فعالية للتخلص من الجذور الحرة مماثلة لتلك الفعالية التي يمتلكها حامض الاسكوربك وتعتمد الفعالية على التراكيز المستخدمة٬ إذ وجد اعلى نسبة تثبيط %94.91 عند التركيز 500 مايكروغرام/مل.

وتضمن الاختبار الاول تأثير المستخلص القلويدي الخام على انقسام الخلايا اللمفاوية لدم الانسان٬ إذ عُرضت الخلايا لسلسلة تراكيز محضرة من المستخلص القلويدي لمدة 24 ساعة. ووجد ان المستخلص القلويدي ادى الى ايقاف انقسام الخلايا اللمفاوية لدم الأنسان في الطور الاستوائي بنسب مختلفة٬ اذ ازدادت النسبة مع زيادة التركيز وتراوحت نسبة الخلايا المتوقفة في الطور الاستوائي بين %3.93-0.56 للتراكيز من 500-15.1 مايكروغرام/مل.

فيما تضمن الاختبار الثاني تأثير المستخلص القلويدي الخام على نمو خلايا الخطوط السرطانية MCF7 وAMJ13 وHC والخط الطبيعي MEF باستخدام اختبار السمية الخلوية Cytotoxic assay. وأظهرت النتائج وجود تأثير سام عالي على الخلايا السرطانية مقارنة بالخلايا الطبيعية وتعتمد درجة التأثير على تركيز المستخلص ونوع الخلايا. إذ وجد ان الفعالية المضادة للأورام تزداد مع زيادة تركيز المستخلص. وكانت أعلى نسبة تثبيط في الخط الخلوي السرطاني MCF7 هي %64.1 بتركيز 500 مايكروغرام/مل واقل نسبة هي %20.07 بتركيز 115. مايكروغرام/مل٬ اما خلايا خط AMJ13 فكانت اعلى نسبة تثبيط هي %79.26 بتركيز 500 مايكروغرام/مل واقل نسبة هي 34.87% بتركيز 15.1 مايكروغرام/مل٬ في حين كانت اعلى نسبة تثبيط في خلايا خط HC  هي 83.2% بتركيز  500مايكروغرام/مل واقل نسبة هي %65.31 بتركيز 15.1 مايكروغرام/مل.

اما في الخط الطبيعي MEF كانت اعلى نسبة تثبيط هي %11.3 عند التركيز 500 مايكروغرام/مل واقل نسبة هي 0% بتركيز  15.1مايكروغرام/مل. استخدم التركيز المثبط النصفي لمعدل النمو IC50 للمستخلص القلويدي الخام لمدة تعريض 24 ساعة على خطوط الخلايا السرطانية لدراسة تأثير المستخلص القلويدي الخام على التعبير  الجيني  للجينات المشفرة لبروتينات الصدمة الحرارية Hsp70٬ Hsp90 وHIF٬ وكذلك جينات الموت الخلوي المبرمج P53٬ BAX٬Caspase8  و Caspase9 باستخدام تقنية (RT-PCR) Real-Time Polymerase Chain Reaction ٬ والكشف عن التأثيرات المورفولوجية للموت الخلوي على النواة باستخدام Propidum IodideAcridine Orange وفحصها بالمجهر المتفلور Fluorescent microscope وكذلك فحص تجزء المادة الوراثية DNA للخلايا.

وأظهرت نتائج التعبير الجيني بأن المستخلص القلويدي الخام ادى الى تثبيط التعبير الجيني للجينات المشفرة لبروتينات الصدمة الحرارية Hsp70٬ Hsp90 وHIF حيث كان التغيير في التعبير الجيني  0.42٬ 0.17 و 0.14 مرة٬ على التوالي في الخلايا المعاملة بالمستخلص القلويدي الخام مقارنة مع مجموعة السيطرة في الخط السرطاني MCF7، اما في الخط السرطاني AMJ13 كانت 0.10٬ 0.27 و 0.76 مرة٬ على التوالي. بينما ازداد التعبير الجيني لجين Caspase9 في الخطوط السرطانية الثلاثة MCF7، AMJ13 و HC مقارنة مع الجينات الاخرى في الخلايا المعاملة بالمستخلص القلويدي الخام مقارنة مع مجموعة السيطرة إذ بلغت 2.57 مرة في الخط الخلوي السرطاني MCF7 و 2.98 مرة في الخط الخلوي السرطاني AMJ13 و3.45 مرة في الخط الخلوي السرطاني HC بينما كان التغيير في التعبير الجيني لجينات P53، BAX و Caspase8 هو 1.02، 0.70 و 0.52 مرة، على التوالي في خط MCF7، و0.05، 0.65 و 0.15 مرة، على التوالي في خط AMJ13 بينما في خط HC كانت 1.63، 0.12 و 0.19 مرة، على التوالي.

وأظهر فحص DNA تقطع المادة النووية في الخلايا المعاملة بالمستخلص القلويدي الخام دليل على حدوث الموت الخلوي المبرمج وبمستوى عالي، بينما ظهرت النواة بشكل متجزء وكروماتين متكثف. وأظهرت جميع النتائج السابقة قدرة المستخلص القلويدي الخام على حث عملية الموت الخلوي المبرمج عن طريق المسار الداخلي للمايتوكوندريا بعد التعريض لمدة 24 ساعة.

وقد تألفت لجنة المناقشة من السادة المدرجة أسماؤهم في أدناه:

أ. د. هادي رحمن رشيد / جامعة ديالى / كلية العلوم … رئيساً

أ. م. د. أسماء محمد صالح / جامعة بغداد / كلية العلوم للبنات … عضواً

أ. م. د. علي زيد فاضل / جامعة النهرين / قسم التقانة الأحيائية … عضواً

أ. د. ابراهيم هادي محمد / جامعة ديالى / كلية العلوم … عضواً ومشرفاً

أ. م. د. عامر طالب توفيق / المركز العراقي لبحوث السرطان والوراثة الطبية … عضواً ومشرفاً

وقد تم قبول الرسالة ومنح الطالبة درجة الماجستير في تخصص علوم الحياة … ألف مبارك.

<<  الموضوع التالي  |  الموضوع السابق  >>